Bouke les spectrofotometrie

• Scheikunde
• Middelbare school
• vwo
• Leerjaar 5

hoe meer water je toevoegt, hoe lichter de kleur

hoe meer water je toevoegt, hoe lichter de kleur

Je zou een verdunningsreeks met oplossingen van de kleurstof kunnen maken. En dan bekijken met welk reageerbuisje de kleur van de limonade overeenkomt. Zo weet je dan (+-) de concentratie van de kleurstof in de limonade.

Spectroscopie

• Techniek die licht gebruikt om chemische samenstellingen      te meten. 
• Kwalitatief: Informatie krijgen over het soort stof, de vorm    van een stof of de aanwezigheid van een stof
• Kwantitatief: Het bepalen van concentraties van opgeloste      stoffen.

Is een alcoholtest voor een schoolfeest een kwalitatitatieve of een kwantitatieve analyse?

1. kwalitatieve analyse
2. kwantitatieve analyse

Dat hangt ervan af

Toont het alleen aan of een leerling wel of geen alcohol heeft gedronken, dan is het een kwalitatieve analyse.

Geeft de test aan hoeveel alcohol een leerling heeft gedronken, dan is het een kwantitatieve analyse.

• zichtbare licht, rontgen, UV, IR,...

• Bevat energie 

Vormen van licht (= elektromagnetische straling)

Colorimetrie

• Je meet hoeveel licht een stof absorbeert.
• Golflengte die gebruikt wordt ligt in het zichtbare gebied.

Waarom zien wij een blauwe trui?

Waarom zien wij een blauwe trui?

De blauwe trui weerkaatst blauw licht. Hij absorbeert juist alle andere kleuren licht. Vooral oranje licht wordt geabsorbeerd, omdat dat de complementaire kleur van lichtblauw is.

Absorptiespectra van biologische moleculen

Chlorofyl a en b zit in groene bladeren

Carotenoïden komen bv voor in de gele, oranje & rode wortels

Je wil de concentratie bepalen van de stof met de blauwe lijn. Welke golflengte is het beste?

1. 450 nm
2. 550 nm
3. 600 nm
4. 700 nm

Spectrofotometer

• Stralingsbron: komt de straling vandaan
• Te onderzoeken stof in het midden: het monster
• Detector aan het einde
• Hoe meer licht geabsorbeerd wordt door de stof, hoe minder op de detector valt.

Spectrofotometer

• Invallende licht wordt geabsorbeerd door de stof
• Maar deels óók door het oplosmiddel of andere deeltjes die aanwezig zijn

• Gebruik van een blanco: Oplosmiddel en alle stoffen, behalve de stof die je onderzoekt.

Je werkt bij Rijkswaterstaat. Er is vermoedelijk een lekkage van een wateroplosbare giftige stof geconstateerd in de Noordzee. Met behulp van spectroscopie wil je de concentratie van de giftige stof in een zeewatermonster bepalen.
Wat zou je als blanco gebruiken?

Intensiteit

• Intensiteit van doorgelaten licht: I
• Intensiteit van licht door blanco: I0
• Transmissie (T)
• => de verhouding tussen I en I0.

• In praktijk meten apparaten niet de transmissie, maar de extinctie (de uitdoving)

• Extinctie wordt gebruikt omdat deze recht evenredig is met de concentratie van de te meten stof, de transmissie niet.

Extinctie

• In praktijk meten apparaten niet de transmissie, maar de extinctie (de uitdoving)

• Extinctie wordt gebruikt omdat deze recht evenredig is met de concentratie van de te meten stof, de transmissie niet.

• E = - log(T)

• Als concentratie van stof 0 is, dan is de transmissie 1 en de extinctie 0.       (want -log(1) = 0)

Extinctie

De extinctie E van een oplossing met een intensere kleur is

1. lager dan van een oplossing met een minder intense kleur
2. hoger dan van een oplossing met een minder intense kleur

Indirecte spectrofotometrie

• Niet alle deeltjes die je wilt weten hebben een kleur, dus dan werkt spectrofotometrie niet.
• Dan voer je een reactie uit waarbij wel een kleur ontstaat
• Vb: ijzer(III)ionen reageren eerst met SCN--ionen tot rode FeSCN2+-ionen

IJklijn

• Voor bepalen van een onbekend monster maak je een ijklijn.
• Extinctie meten van meerdere standaardoplossingen met verschillende concentraties.
• Noem je een ijkreeks.

Welke manier om een ijkreeks te maken is het netste?

1. links
2. rechts

Bij 1 mL stockoplossing wordt 4 mL water gedaan om te verdunnen voor een ijkreeks.

Wat is de verdunningsfactor?

1. 10 keer
2. 4 keer
3. 5 keer
4. 2 keer

IJkreeks  

verdeelpipet

stockoplossing 

[E133] = 1,0*10^-5 M

IJklijn

• Lijn trekken tussen de punten van de gemeten extincties.

• Daarna het onbekende monster meten en aflezen wat de concentratie is.

Het monster in dit onderzoek werd 2x verdund en daarna gemeten. De extinctie was 0,6.

Wat is de concentratie?

1. 0,1 gram/L
2. 2,6 gram/L
3. 5,2 gram/L
4. 10,4 gram/L

Volgens de Europese norm mag drinkwater maximaal 50 mg nitraat per L bevatten. Aan 25 mL Voorburgs drinkwater wordt 25 mL demi-water toegevoegd. De extinctie van de verkregen oplossing bedraagt 0,45. Bereken het nitraatgehalte (in mg per L) van Voorburgs drinkwater om te controleren of dit aan de Europese norm voldoet. Gebruik de gegeven ijklijn.

Zie het absorptiespectrum.
Bij welke golflengte ga je de concentratiemetingen van "stof X" meten?

1. 400 nm
2. 500 nm
3. 650 nm
4. 800 nm

Leerdoelen §13.4

Na deze paragraaf weet / kan ik...:

• uitleggen hoe een spectrofotometer globaal werkt;
• het verschil tussen een monster en blanco uitleggen;
• uitleggen wat een ijklijn is en hoe je die gebruikt;
• zelf de concentratie van een onbekende oplossing berekenen.

Belangrijke begrippen

• Monster: te onderzoeken stof
• Blanco: alle stoffen behalve de te onderzoeken stof
•       : intensiteit door het monster
•       : intensiteit door de blanco
• T: transmissie (I/I(o))
• E: extinctie (uitdoving)

I

I​0​​

Zelf een ijklijn maken

Maken met limonade een ijklijn om vervolgens de concentratie te bepalen van de limonade van meneer Vermaat.