Chromatografie 2

• NT2
• MBO
• Studiejaar 2

Open alvast de lessonup!

Lessonup.app

De les komt op Teams te staan!

Wie ben ik?

Giyan Scheers

- Westervoort

-2e jaars student 

-21 Jaar

-Docent scheikunde

- Muzikant

- Spelletjes doen, Skaten

Vandaag: Chromatografie

Mijzelf introduceren

Chemische Analyse Hoofdstuk 18(P. 5 & 6)

- Scheidingsprincipes 

- Verdelingscoëfficiënt

- Nettoretentietijd

Scheidingsprincipes

Welke scheidingsmethoden ken je?

Scheidingsprincipes

Welke scheidingsmethoden ken je?

Absorptie   Indampen

Adsorptie  Destillatie   

Elektrolyse Extractie   

Filtratie

Scheidingsprincipes

Welke scheidingsmethoden ken je?

Absorptie   Indampen                                     Oplosbaarheid

Adsorptie  Destillatie                                      Aanhechtingsvermogen  Elektrolyse Extractie                                       Ionlading

Filtratie                                                                  Deeltjesgrootte

                                                                                  Verschil in kookpunt

Scheidingsprincipen in de Chromatografie

Oplosbaarheid 

Deeltjesgrootte

Ionlading

Aanhechtingsvermogen 

Verschil in kookpunt

Oplosbaarheid

Stel je voor:

De kolom heeft een apolaire

stationaire fase. 

Je scheidt een mengsel van

Pentanol                en      Butanol

Welke komt er als eerste uit?

Deeltjesgrootte

- Gel electroforese is chromatografie 

op basis van deeltjesgrootte(en 

lading).

Hoe werkt dit?

Deeltjesgrootte

- Gel elektroforese is chromatografie 

op basis van deeltjesgrootte.

Hoe werkt dit?

DNA is negatief geladen.

Hoe groter het DNA, hoe negatiever

negatiever = meer aantrekking tot plus-pool

Ionlading

Eiwitten hebben op een specifiek pH een specifieke lading. Deze lading is afhankelijk van de functionele groepen.

Stel je scheidt:

Ionlading

In een oplossing met een hoog pH zullen alle functionele groepen niet voorzien zijn van waterstofatomen

In een oplossing met een laag pH zullen alle functionele groepen  voorzien zijn van waterstofatomen

Ionlading

In een oplossing met een hoog pH zullen alle functionele groepen niet voorzien zijn van waterstofatomen

In een oplossing met een laag pH zullen alle functionele groepen  voorzien zijn van waterstofatomen

En dus zullen de ladingen van aminozuren verschillen!

Aanhechtingsvermogen/adsorptie

Bijvoorbeeld norit in 

gasmaskers. 

Laat de lucht die je wil blijven

ademen door, maar rook niet!

(vaste roetdeeltjes in de lucht)

Analyse gecontamineerd water

Welke chromatografische
methode zie je hier, en op welk
principe berust
deze techniek? Stationaire fase
is apolair

1. Kolom ionlading
2. TLC oplosbaarheid
3. Papier deeltjesgrootte
4. Kolom oplosbaarheid

Welke scheidingsmethode zou je kunnen gebruiken om twee negatief geladen aminozuren te scheiden?
Tip: Aminozuren hebben een unieke elektrische lading

Kolom

Elektroforese

Papier

TLC

Andere

De verdelingscoëfficient

K is de verdeling van het component in 

de mobiele en stationaire fase.

Cm is de concentratie van het 

component in de mobiele fase

Cs is de concentratie van het

component in de stationaire fase

Stof één heeft een K van 1,5
Stof twee heeft een K van 0,5
Welke zijn juist?

1. Stof twee zal eerder uit de kolom komen
2. Stof twee zal helemaal niet uit de kolom komen
3. Stof één zal eerder uit de kolom komen
4. Beiden stoffen zullen uit de kolom komen

Netto retentietijd t'R

Y-as: signaalsterkte gemeten

           stoffen(spectrometer)

X-as: Tijd in seconden

tR= tijd van totale elutie

tM= tijd waarin de mobiele

         fase elueert. 

t'R= tijd van component in sf

Een mengsel van stoffen elueert
door een kolom. En dit is de grafiek.
Welke stof heeft een kortste t'R?
Leg uit!

Terugblik!

Wat kan je mij vertellen over:

- Scheidingsprincipes

- Verdelingscoëfficiënt

- Netto retentietijd