Bs 2 DNA replicatie, PCR en sequencen

• Biologie
• Middelbare school
• vwo
• Leerjaar 5

Wie (wat) maakt het DNA weer dubbel streng?

1. DNA-polymerase
2. helicase
3. primer
4. chromosoom

Wat doet de primer?

1. De DNA ketens uit elkaar halen
2. De Okazaki fragmenten aan elkaar koppelen
3. Nieuwe nucleotiden inbouwen
4. Startpunt van replicatie

Primase

RNA Primer

SSBP's

DNA-polymerase

Helicase

Okazaki fragment

DNA-ligase

3' ACTGGGCCGATTCAAGCTATACCGGGTTCATTGACTAA 5'

5' TGACCCGGCTAAGTTCGATATGGCCCAAGTAACTGATT 3'

Sleep de juiste primer naar de juiste plek op het DNA.

5' CGGCTAAG 3'

3' TCATTGAC 5'

5' TCATTGAC 3'

3' CGGCTAAG 5'

PCR - Polymerase Chain Reaction

PCR

https:

-techniek waarmee je DNA fragmenten op grootte kunt scheiden.

gelelektroforese

Leerdoel:

• Je kan uitleggen hoe de DNA sequentie ontrafeld kan worden.
• Je kan uitleggen hoe een gelelektroforese werkt
  

2

link

DNA-onderzoek mbv restrictie-enzymen

Restrictie-enzymen

• herkennen specifieke nucleotidensequentie (4-8 nucleotiden)
  
• knippen DNA op die plaats door
• aantal repeats bepaalt lengte
• lengtes scheiden met gelelektroforese

DNA fingerprinting

Restrictie enzymen

- DNA profielen van organismen vergelijken om zo afkomst te kunnen bepalen of organismen te kunnen identificeren 

- enzymen die specifieke DNA sequentie herkennen en hier op een unieke manier het DNA knippen

Niet-coderend DNA

• 98,5% van genoom mens bestaat uit  niet-coderend DNA
  
• niet coderend DNA : coderen voor regulerende moleculen
• deel is repetitief DNA: herhalende nucleotidesequenties bv. GCAAGCAAGCAA 

DNA fingerprinting

• Repetitief DNA in niet-coderend DNA, aantal herhalingen verschilt per persoon
• PCR om DNA te vermeerderen
• Restrictie-enzymen knippen loci met repetitief DNA uit DNA
• Loci worden met gelelectroforese op lengte van elkaar gescheiden

DNA fingerprints die gebruikt worden in de rechtszaal lijken een beetje op de streepjescodes zoals je die op produkten in de supermarkten aantreft. Het patroon van de streepjes in een fingerprint komt overeen met

1. de aanwezigheid van DNA-fragmenten van verschillende grootte
2. de volgorde van de genen op bepaalde chromosomen
3. de aanwezigheid van dominante en recessieve allelen voor bepaalde eigenschappen
4. de volgorde van basen in een bepaald gen