Bij de ontwikkeling van het embryo zorgt het voor de ontwikkeling van de mannelijke primaire geslachtskenmerken (onder andere externe geslachtsorganen); zonder testosteron ontwikkelt een embryo zich vrouwelijk, zie homologie (anatomie).
Tijdens de puberteit zorgt het voor de ontwikkeling van de mannelijke secundaire geslachtskenmerken (onder andere stemhoogte, groei van penis, balzak, lichaamsbeharing en skeletspieren).
Na de puberteit zorgt testosteron voor het in stand houden van het mannelijk voortplantingsapparaat, de mannelijke vormen en de productie van sperma.
Bij mannen en vrouwen speelt het een rol bij de libido.
Testosteron zorgt ook bij vrouwen voor de groei van schaamhaar tijdens de puberteit.
Testosteron stimuleert de groei van skeletspieren.
Onder invloed van testosteron verandert de talgproductie, een van de oorzaken van acne.
Testosteron speelt een rol bij het verlies van hoofdhaar bij mannen.
Testosteron heeft invloed op de lateralisatie van de hersenen