Onderzoeksplan

• Biologie
• WO
• Studiejaar 1

Onderzoeksplan

Nikki te Lintelo

Stagiare Medical Biology

Achtergrond

• Doel: Behoud van ledematen optimaliseren voor replantatie
• 24h extracorporeal perfusion (ECP)
• 4h static cold storage (SCS) 
• Bloedgassen, spierbiopten, IC-groen, EMG
• Replantatie
• 7 dagen follow-up

extensor

flexor

-Amputatie linker voorpoot

-24h MPS: perfusie machine waar gedurende 24h zuurstofrijke perfusievloeistof doorheen gepompt word (HTK met PEG)

-4h SCS (golden standard): gedurende 4 uur in een piepschuimen bak met ijs

- Op verschillende tijdspunten nemen we bloedgassen, lactaat, glucose etc. af en ook biopten

- spierbiopten (flexor / extensor) op formaline (HE kleuring)

- Vries biopten (-150 in isopentaan) die krijgen enzymkleuring NADH en MAC

--> mate van spierschade bepalen

- Replantatie ondersteboven: tegen compartimentsyndroom (verstoring van de bloedtoevoer door zwelling binnen een 'compartiment'), zetten zenuwen niet terug --> geen gevoel --> knagen, zodat het varken er niet op gaat liggen

-7 dagen follow-up (POD1-3-7 bloedgas, biopt, 3 en 7 IC-groen en EMG (elektromyography)

Onderzoeksvraag

How can ischemia reperfusion related alterations be reduced in muscle tissue?

Subresearch question A:

Can ischemia reperfusion related alterations be decreased/minimalized in muscle tissue with extracorporeal perfusion?

Subresearch question B:

How can ischemia reperfusion related alterations be visualized in muscle tissue and be optimized in a grading-system?

Methode

Biopten

• Formaline           HE
• Snap-freeze            NADH/MAC
• Beoordelen 
• Scoringssysteem

scoringssysteem

overzicht biopten

- Snapfreeze bij -150 in isopentaan

- Gesneden, gekleurd en ingescand bij pathologie 

- Samen met Dominique van Midden beoordelen op mate van spierschade en scoringssysteem maken

- easy-to-use voor artsen en andere betrokkenen die dit kunnen gebruiken om weefsel snel en relatief makkelijker te kunnen beoordelen

- Kaj wil in een vervolgstudie verder met 1 van de 3 kleuringen (welke meest sensitief etc.)

Vragen

of 

feedback?