Chromatografie les 02

• Chromatografie
• MBO
• Studiejaar 2

Chromatografie | Les 02

03 februari 2022

Planning

• Herhaling
• Klassieke chromatografie
• Gaschromatografie

Herhaling

Wat wordt er bedoelt met retardatie factor bij DLC (dunnelaag chromatografie)

1. De vertragingsfactor van een component
2. De oplosbaarheidsfactor van een component
3. De mobiele fase
4. De stationaire fase

Scheidingsprincipe	Hoe?
Ionwisselaar
Adsorptie
Oplosbaarheid
Molecuulgrootte

Aspirine lost beter op in water dan in methanol

H+ wordt vervangen door Mg2+

Een molecuul met Mw 567 g/mol komt er sneller uit dat een molecuul van 1022 g/mol.

Het papierchromatografie proefje van vorige week.

Water is

1. polair
2. apolair

Methanol

1. polair
2. apolair

Een vetzuur is

1. polair
2. apolair

Klassieke kolomchromatografie

Glazenbuis met stationaire fase (silicagel). Mobiele fase= geschiktbare vloeistof (vaak polair)

Gebeurt niet veel meer op laboratoria.

Moderne chromatografie

GC	Gaschromatografie hoofdstuk 19 (Gaschromatography)
HPLC	Hogedruk vloeistof chromatografie hoofdstuk 20 (High pressure/performance liquid chromatography)
UPLC	Ultradruk vloeistof chromatografie (Ultra Pressure Liquid Chromatography)
IC	Ionchromatografie (Ionchromatography)
SEC	Size exclusion chromatography

Gaschromatografie hfst 19

GLC = Gas liquid chromatography

GC of GSC (gas solid chromatography)

Analyse van bijvoorbeeld:

Pesticiden gehalte

Gas samenstelling

Vet samenstelling

Oplosmiddelen in grond

etc...

GLC en GC. Het verschil zit in de stationaire fase in de kolom

GC

GLC

Stationaire fase is een vaste stof

Stationaire fase is een vloeibare stof

Principe

GLC : Verdeling over de stationaire en mobiele fase.

GC (GSC) : Adsorptie aan de stationaire fase

Kookpunt van monster speelt bij beide een rol! 

Monster wordt in gasfase gebracht.

3e jaars lab

Draaggas

Mobielefase is hier de draaggas.

N₂, H₂, He en/of Ar.

Injector

Keuze van injector afhankelijk van je kolom en monster concentratie.

• Standaard injectiepoort
• Splitinjector
• Headspace

Temperatuur injector minimaal hoogste kookpunt van je component!

Kolom

Gepakte kolom

2-4mm, bv: 3 m lang

Capillaire kolom

0,2-0,5 nm, 150 m lang.

Foto op blz 334.

Detector

Thermisch geleidingsdetector (TCD)

Vlamionisatiedetector (FID)

Resultaat

Waar moet een draaggas aan voldoen

1. Het draaggas mag niet door je kolom gaan.
2. Het draaggas moet goedkoop zijn.
3. Het draaggas moet een bepaalde waarde hebben.
4. Het draaggas mag niet reageren met je monster.

Noem een voorbeeld van een mobiele fase bij gaschromatografie

Welke kolom is over het algemeen langer?

1. Gepakte kolom
2. IC kolom
3. Capillaire kolom
4. Hoge druk kolom

Kies de juiste solvent piek, door het bolletje te schuiven.

Een monster bevat componenten de volgende kookpunten: comp A: 68°C, comp B 156°C, comp C: 175°C. Op welke temperatuur moet de oven van de GC minimaal staan?

1. 68°
2. 156°
3. 175°
4. 243°

Planning

• Herhaling
• Klassieke chromatografie
• Gaschromatografie

Volgende week: verdieping injectiepoort, kolom, detector, aflezen chromatogrammen.

Lees voor jezelf blz 329 - 337, 339-340