PCR en Gel elektroforese, splicing

• Biologie
• Middelbare school
• vwo
• Leerjaar 5

PCR en Gel elektroforese, splicing

PCR

Belangrijke stappen in PCR zijn:

- Denaturatie

- Hybridisatie 

- Elongatie 

 30-40x

PCR

PCR

Binas 71M_2

Sequencing

Het bepalen van de nucleotidevolgorde van DNA.

• Met PCR en gelelectroforese
• Met PCR en capillairelectroforese

Leerdoel:

• Je kan uitleggen hoe de DNA sequentie ontrafeld kan worden.
• Je kan uitleggen hoe een gelelektroforese werkt
  

2

link

Gelelektroforese

Techniek waarmee je DNA-fragmenten op grootte kunt scheiden

DNA-fingerprinting

• Repetitief DNA in niet-coderend DNA, aantal herhalingen verschilt per persoon
• PCR om DNA te vermeerderen
• Restrictie-enzymen knippen loci met repetitief DNA uit DNA
• Loci worden met gelelektroforese op lengte van elkaar gescheiden

DNA Technieken (3)

DNA-fingerprinting

Vergelijken DNA van personen d.m.v. gelelektroforese.

Restrictie-enzym: herkent en knipt een specifieke nucleotidenvolgorde

Fragmenten worden door gelelektroforese gescheiden en vergeleken.

Intron vs. exon 

Genen isoleren

Gen opbouw in eukaryoten vs prokaryoten

- Exonen en intronen

RNA-processing

Waarom introns en exons?

Door verwijderen introns kunnen exons in verschillende volgorde in mRNA teruggeplaatst worden. 

Er kunnen dus meerdere versie van een eiwit gemaakt worden!

BINAS 71H

exons...

Een exon (van Engels: expressed region) is het coderend gedeelte van een gen. Het grootste deel van de exons zal uiteindelijk coderen voor het polypeptide dat door het betreffende gen bepaald wordt. De delen van het gen die niet in het uiteindelijke mRNA terechtkomen, worden introns genoemd.

De situatie is enigszins te vergelijken met een boek waar tussen de leesbare tekst door opeens enkele regels staan die uit willekeurige letters bestaan. Deze willekeurige letters zullen in het uiteindelijke "boek" ertussenuit gehaald worden, waardoor een verhaal zal ontstaan dat volledig leesbaar is. De exons vormen de leesbare tekst.

vervolg exons...

Niet alle organismen hebben introns tussen de exons van hun genen. Introns komen hoofdzakelijk voor in eukaryote organismen (organismen waarvan de cellen een celkern hebben). Wetenschappers speculeren nog over de functie(s) die introns mogelijk toch hebben.

(bron: wikipedia) ;