Tempera speelde ook een belangrijke rol bij het maken van iconen en het verluchten van manuscripten. Iconen zijn afbeeldingen van Christus, Maria of heiligen geschilderd op een houten paneel. Ze behoren tot de oosters-orthodoxe en oosters-katholieke godsdiensten. De vervaardiging van een icoon wordt binnen die kerken als een religieuze handeling beschouwd. Volgens de traditie wordt enkel gebruikgemaakt van natuurlijke materialen, zoals hout, krijt, hars, tempera en eventueel bladgoud. Ook iconen die vandaag vervaardigd worden, worden traditiegetrouw met tempera geschilderd.