Bonte rij

Bonte rij
Vandaag
Uitleg SLB taak: Overzicht media en micro-organismen
Buis 1: DSI
Buis 2 LDC
1 / 39
next
Slide 1: Slide
BiologieMBOStudiejaar 3,4

This lesson contains 39 slides, with interactive quizzes and text slides.

Items in this lesson

Bonte rij
Vandaag
Uitleg SLB taak: Overzicht media en micro-organismen
Buis 1: DSI
Buis 2 LDC

Slide 1 - Slide

SLB taak: Overzicht media en micro-organismen
  • Per SLB groep 1 tabel invullen
  • Tabel is te vinden op pagina 15 van je dictaat
  • 1e kolom: Naam van de buis
  • 2e kolom: eigenschappen die je test per buis
  • 3e kolom: substraat (wat zit er in de buis)
  • 4e kolom: product (wat ontstaat er, of is er te zien)
  • 5e kolom: welke indicator zit erin en welke kleuromslagen kun je zien?
  • 6e kolom: ruimte voor extra tekst/opmerkingen/uitleg
  • Uiterlijk 14-09 inleveren als SLB groep

Slide 2 - Slide

Bonte rij
Bonte rij van school wordt gebruikt voor de identificatie van gram-negatieve bacteriën
  • Jullie gaan de bonterij inzetten met  Enterobacteriaceae (gram negatieve barm bacillen).
  • Determineren van bacteriën
  • Waarom wordt dit de “Bonte rij” genoemd?

Slide 3 - Slide

De buizen van de bonte rij van school 
  1. DSI
  2. LDC
  3. ODC
  4. Peptonwater
  5. Ureum
  6. Inositol

Slide 4 - Slide

1: DSI (Double Sugar Iron)
Vast, rood/oranjeachtig medium met schuinoppervlak
  • Rechte streep met steekent
Bevat:
  • 2 suikers (glucose en lactose 1:10)
  • pH indicator (fenolrood)
  • Neutraal=rood
  • Zuur=geel
  • Basisch=roze
  • Na2S2O3 en IJzercitraat


Slide 5 - Slide

DSI buis
5 eigenschappen:
Glucose fermentatie (alleen gele stomp)
  • Bij glucosefermentatie ontstaan zure producten pH indicator roodgeel
  • Niet geel maar oranje? --> Bonte rij mag niet worden afgelezen, alle Enterobacteriaceae fermenteren glucose.
Lactose fermentatie (oppervlak buis geel)
  • Bij lactosefermentatie ontstaan zure producten pH indicator roodgeel
Zwerming (groei over gehele oppervlak)
  • Mo kan voortbewegen over het oppervlak met flagellen
Zwavelreductie (zwart neerslag)
  • Reductie van NaS2O3 waarbij H2S gas vrij komt. Het Fe uit Ijzercitraat reageert met de S tot FeS
Gasvorming (gasbellen/scheuren)
Ontstaan bij de vergisting van suikers (CO2 en H2)

Slide 6 - Slide

Slide 7 - Slide

2 LDC buis (Lysinedecarboxylase)
Paars, vast medium, schuin gestold
Beenten met slingerent en steekent

Bevat:
  • Lysine (aminozuur)
  • Indicator (Broom Cresol Purper)
  • Ijzer-ammoniumcitraat


Is paars in basische omgeving
Is geel in zure omgeving

Slide 8 - Slide

LDC buis
Eigenschappen:
Bevat het enzym lysinedecarboxylase (paarse stomp)
  • CO2 wordt afgesplitst van COOH groep en ontsnapt uit de buis. Wat overblijft is basisch, de indicator wordt paars in de stomp.
Bevat het enzym lysinedeaminase (rood oppervlak)
  • NH2-groep wordt afgesplitst en omgezet tot NH3+. Dit reageert met ijzer-ammoniumcitraat tot een zuur product bij het oppervlak.

Slide 9 - Slide

Slide 10 - Slide

Vandaag
Korte herhaling DSI en LDC
Theorie buis 3: ODC
Theorie buis 4: pepton water

Slide 11 - Slide

Herhaling buis 1 en 2
  • Waarvoor wordt Bonte rij gebruikt?
  • Waar let je op voordat je de buizen af kunt lezen?
  • Wat zie je bij de DSI buis wanneer de bacterie glucose en lactose kan fermenteren?
  • Welke reactie katalyseert het enzym lysinedeaminase?



Slide 12 - Slide

Buis 3: ODC (Ornithinedecarboxylase)
Halfvast medium met paars/gele kleur
Steekent

Bevat:
  • Ornithine (aminozuur)
  • Indicator Broom Cresol Purper


Paars in basisch milieu en geel in zuur milieu

Slide 13 - Slide

ODC
Eigenschappen:
Bezit van het enzym ornithinedecarboxylase (anaeroob)
  • Decarboxylase verwijderd de CO2 van COOH
  • CO2 wordt afgesplitst van COOH groep. Het basische restproduct blijft paars
  • Negatieve buis wordt geel door verzuring tgv. glucosefermentatie
Beweeglijkheid
Groei naast de steeklijn (aftakkingen of troebel)


Slide 14 - Slide

Slide 15 - Slide

Buis 4: peptonwater
Vloeibaar medium: beenten met een oog ose.
-Kolonie aantikken, oogje vullen met medium, buis schuin houden, uitsmeren, mengen.
Bevat:
Tryptofaan (aminozuur)

Eigenschap:
Bezit van het enzym tryptofanase
Wordt afgelezen mbv Kovac's reagens
 
para-dimethylbanzaldehyde (indicator)
Drijft op het medium omdat Kovac's butanol bevat.
Vormt een rood complex met indol 
Blijft geel zonder indol
Het enzym tryptofanase zet het aminozuur tryptofaan om in indol en pyruvaat

Slide 16 - Slide

Slide 17 - Slide

peptonwater buis
NIET FLAMBEREN!!!
Kovacs is brandbaar 
en de buis is van plastic

Slide 18 - Slide

Vandaag
Korte herhaling ODC en peptonwater
Theorie buis 5: Ureum agar
Theorie buis 6: Inositol

Slide 19 - Slide

Herhaling buis 3 en 4
ODC
  • Waar staat ODC voor?
  • Wat zie je aan de buis wanneer de bacterie ODC negatief is?
  • Waarom is ODC een halfvast medium?
Peptonwater
  • Waarom wordt kovacs-reagens toegevoegd?
  • Waarom blijft kovacs-reagens boven op peptonwater drijven?
  • Welke eigenschap test je hier?
  • Hoe ziet een positief resultaat eruit?


Slide 20 - Slide

Korte herhaling
  1. Waarvoor wordt Bonte rij gebruikt?
  2. Welke buizen bevat de Bonte rij?
  3. Hoe zie je een positief resultaat voor lactose?
  4. Waar in de buis lees je het resultaat voor glucose af?
  5. Wat betekent scheuren in het medium?
  6. Hoe kan er een zwarte kleur ontstaan?
  7. De bacterie bevat geen LDC. Wat zie je in de LDC buis?
  8. De bacterie bevat wel LDA. Wat zie je in de LDA buis?


Slide 21 - Slide

Buis 5: Ureumagar
Vast, geel medium met schuin oppervlak
Alleen slingerent, zigzagent met een steeköse
Bevat:
  • Fenolrood (indicator)
  • Ureum
Eigenschap: Bezit van urease
Ureum wordt omgezet tot ammoniak (NH3) en CO2. Dit wordt weer omgezet tot ammonia (NH4+) wat basisch is, waardoor de buis roze kleurt.




Rood in basich milieu en roze bij een pH>8,1
Zuur in een zuur milieu

Slide 22 - Slide

Slide 23 - Slide

Buis 6: Inositol medium
Vloeibaar medium met rode kleur (Hoe beenten?)
Bevat: 
Inositol (koolhydraat)
Fenolrood als indicator

Eigenschap: fermentatie van inositol 
Wat betekent fermentatie?
Wat ontstaat hierbij?



Kleurt rood in basisch milieu
Kleurt geel in zuur milieu

Slide 24 - Slide

Slide 25 - Slide

Slide 26 - Slide

Koolhydraat fermentatie
Herhaling Leerjaar 1

Slide 27 - Slide

Herhalingsvragen bonte rij

Slide 28 - Slide

Waar begin je mee voordat je een buis kunt aflezen?

Slide 29 - Open question

Wat is het doel van de bonte rij?

Slide 30 - Open question

Hoe ziet een DSI buis eruit met een positieve reactie voor zwavelreductie?

Slide 31 - Open question

Slide 32 - Slide

Slide 33 - Slide

LDC knipt
LDA knipt
ODC knipt

Slide 34 - Drag question

Lees de drie LDC buizen af.

Slide 35 - Open question

Wanneer slaat fenolrood om van rood naar geel?
A
In een zuur milieu
B
In een basisch milieu

Slide 36 - Quiz

Wat heeft een bacterie nodig om te kunnen zwermen?
A
Pili
B
Halfvast medium
C
Bouillon
D
Flagel

Slide 37 - Quiz

Welke eigenschap van de bacterie toon je aan in de indolbuis?

Slide 38 - Open question

Waarom neem je een positieve en een negatieve controle mee?

Slide 39 - Open question