ANA en SDS PAGE

• ELISA
• MBO
• Studiejaar 3

Leerdoelen SDS PAGE

1. De student beschrijft het principe van SDS-PAGE

2. De student kent de verschillende stappen van SDS-PAGE

3. De student weet waarom hij/zij de stappen van de bepaling onderneemt

4. De student kent de begrippen van de SDS-PAGE

5. De student weet wanneer hij/zij deze techniek moet toeppassen

6.De studenten kan de resultaten van den SDS-PAGE interpreteren

Leerdoelen ANA

1. De student kan uitleggen wat het principe is van een indirecte fluorescentietechniek

2. De student kent de verschillende begrippen van ANA

3. De student (her)kent het fluorescentiepatroon van een positief en negatief monster.

4. De student kan veelvoorkomende patronen van een positief monster opnoemen en deze linken met verschillende auto-immuunziekten.

5. De student kan de resultaten van ANA interpreteren.

6. De student weet wanneer hij/zij deze techniek moet toeppassen

 

SDS-PAGE is een scheidingstechniek van...op basis van hun....

1. SDS-PAGE is een scheidingstechniek van eiwitten op basis van hun moleculair gewicht
2. SDS-PAGE is een scheidingstechniek van eiwitten op basis van hun lengte
3. SDS-PAGE is een scheidingstechniek van eiwitten op basis van hun lading
4. SDS-PAGE is een scheidingstechniek van vetten op basis van hun moleculair gewicht

In welke eenheid wordt het moleculair gewicht van de eiwitten uitgedrukt?

Een eiwit heeft een moleculair gewicht van 55,4 kDa. Hoeveel dalton is dit?

Wat is de functie van albumine in het lichaam?

Albumine gebruiken jullie als controle eiwit. Zoek op wat het moleculair gewicht van albumine is (zie protocol).

Teken deze eiwitladder na en teken de albumine lanen ernaast. Laat controleren door de docent

Hoe noemen we ook alweer de twee soorten gels die we gebruiken?

1. Running en docking gel
2. Flowing en stacking gel
3. Running en stacking gel
4. Dominant en recessive gel

Running gel

Stacking gel

Hier vindt de daadwerkelijke scheiding plaats

pH= 8.9

Het doel van deze gel is dat de eiwitten samen beginnen te migreren

De samples worden hier op gepippeteerd

Heeft grotere poriën en eiwitten kunnen vrij bewegen en worden zo geconcentreerd

pH= 6.9

Hoe groter het gehalte aan polyacrylamide hoe.... de poriën

Naast de twee gels, maak je nog een andere buffer. De sample buffer. Je lost jouw monsters op in deze buffer. Noem de stoffen van deze buffer.

Wat is de functie van SDS? En waarom is dit belangrijk?

Bij wat voor onderzoek kies je als analist voor SDS-PAGE?

Hoe heet de techniek die een analist uitvoert na een SDS-PAGE om een specifiek eiwit aan te tonen?

ANA staat voor...

1. Antinucleaire antistoffen
2. Antinasale antistoffen
3. Antiperitone antistoffen
4. Antivolaire antistoffen

Leg uit wat ANA's zijn

ANA's kun je aantonen met een fluorescentietechniek middels een specifiek molecuul. Hoe heet zo'n molecuul?

Welk fluorochroom gebruiken jullie in de praktijk en welke zijn er nog meer?

Benoem de pijlen

https:

Wat bedoeld men met titer?

Je gaat de ANA IFT van 4 patiënten uitvoeren. Welke patiënt heeft het meeste kans op een auto-immuunziekte?

1. Patiënt 1: 1:80 is + 1:120 is + 1:320 is -
2. Patiënt 2: 1:80 is + 1:120 is + 1:320 is +
3. Patiënt 3: 1:80 is + 1:120 is - 1:320 is -
4. Patiënt 4: 1:80 is - 1:120 is - 1:320 is -

Waarom heeft deze patiënt de meeste kans op auto-immuunziekte?

Een lage titer komt bij 1% van de 'gezonde personen' voor en betekent een niet specifieke binding.

Wanneer zowel de minst verdunde monster (1:80) als de meest verdunde monster positief is (1:320) betekent dit dat de patiënt mogelijk een auto-immuunziekte heeft en verder onderzoek nodig heeft. Wanneer alleen de 1:80 positief is wijst dit op een aspecifieke binding

Het fluorescentiepatroon is afhankelijk van welk kernonderdeeltje de auto-antistof 'aanvalt' (=bindt). Dit is dus afhankelijk van het type...

Zo heb je dus fluorescentiepatronen die met een bepaalde zekerheid gelinkt kunnen worden aan auto-immuunziekten.

Zo heb je dus fluorescentiepatronen die met een bepaalde zekerheid gelinkt kunnen worden aan auto-immuunziekten

Dit onderzoek laat zien dat bepaalde patronen vaker voorkomen bij een specifieke auto-immuunziekte. Vraag eventueel aan de docent om meer uitleg

Zoek een afbeelding van een homogeen fluorescentiepatroon en laat controleren door de docent.

Zoek een afbeelding van een gespikkeld fluorescentiepatroon en laat controleren door de docent.

Zoek een afbeelding van een centromeer fluorescentiepatroon en laat controleren door de docent.

Centromeer

of

Zoek een afbeelding van een nucleolair fluorescentiepatroon en laat controleren door de docent.

Bij wat voor onderzoek kies je als analist voor ANA IFT?