BMI Eiwit Praktijkhoofdstukken

• Biologie Laboratoriumtechniek
• MBO
• Studiejaar 2

BMI Eiwit

Digitale lessen

Focus op:

Praktijkhoofdstukken H6 - 9 

Plan

• Behandelen verslag BMI eiwit
• Herhalen Gel permeatie chromatografie (GPC)
• Behandelen SDS-PAGE

Wat is het doel van Gel permatie chromatografie?

Welke moleculen gaan het snelste door een GPC kolom?

1. De grootste
2. De kleinste
3. De meest postief geladen moleculen
4. De meest negatief geladen moleculen?

Sephadex bolletjes heb je met verschillende grootte poriën. Waarom is de porie grootte belangrijk bij GPC?

Scheiden op grootte met

Sodium Dodecyl Sulphate–PolyAcrylamide Gel Electrophoresis

Denatureren van eiwit tot primaire structuur (samen met hitte). Binden aan aminozuurketen om negatieve lading te geven.

Welke eiwit structuur niveau's verbreekt door SDS?

1. Primaire
2. Secundaire
3. Tertiaire
4. Quaternaire

Verbreken zwavelbruggen met Beta-mercaptoethanol

Welke eiwit structuur niveau wordt verbroken door beta mercaptoethanol?

1. Primaire
2. Secundaire
3. Tertiaire
4. Quaternaire

Principe

Aminozuur keten negatief geladen. 

In oplossing op SDS PAGE gel laden

Loopt naar plus pool.

Grote eiwitten traag, kleine eiwitten snel (net als bij DNA gel elektroforese)

Stacking gel

Minder grote dichtheid. Eiwitten stromen makkelijk door deze gel en hopen op op de grens met de echte scheidings gel. 

Wat is het nut van de stacking gel?

Coomassie blue

2 dimensionale eiwitscheiding

Voor volgende week online theorie

Maken opgaven H8.

We gaan deze dan bespreken samen met die van H7.

Inlezen H9 antilichamen

BMI Eiwit

Digitale lessen

Focus op:

Praktijkhoofdstukken H6 - 9 

Plan

• Word workshop
• Herhalen SDS-PAGE
• Behandelen Antilichamen

Word workshop verslag

Voorblad

Inhoudsopgave

Kopjes

Paginanummering

Referenties

Bibliografie

Herhaling SDS PAGE

Welke twee denaturerende stoffen worden aan de eiwitoplossing toegevoegd voor SDS Page en wat is hun functie?

Wat is het doel van een SDS PAGE experiment?

Immunoglobulinen / Antilichamen / Antistoffen / Antibodies (Engels)

Leg uit in eigen woorden wat een antigeen is.

Geef 3 andere benamingen van antilichaam

Voor volgende week online theorie

Maken opgaven H9.

We gaan deze dan bespreken samen met die van H7.

Inlezen H antilichamen

BMI Eiwit

Digitale lessen

Focus op:

Praktijkhoofdstukken H6 - 9 

Plan: Verslag Eiwit

- Word functies?

- Schrijfstijl?

-Hoofdvraag Verslag?

- Werkwijze?

- Bronnen?

- Principes van de experimenten?

- Hoe verwerk je je data?

Wat moet je doen qua Word functies voor een verslag?

Schrijfstijl

Persoonlijk:

Wij verwachten dat [...]

Hieruit concluderen wij dat [...]

Onpersoonlijk:

De verwachtingen van dit onderzoek zijn [...]

De conclusie is dat [...]

Toen heb ik de bolletjeskolom gevuld met een beetje eiwit mengsel monster.

Uit de resultaten haalde ik leuke informatie, namelijk dat het gehalte eiwit toch wel 672,230124 ng/ml was.

Ik vind het resultaat niet betrouwbaar, want er zijn wat kleine foutjes gemaakt tijdens het experiment.

Wat zou de hoofdvraag kunnen zijn van het verslag?

Wat is belangrijk bij de verwerking van de werkwijze's in het verslag?

Hoe gebruik je bronnen?

Principe lysozymen?

Principe GPC?

Principe nanodrop?

Principe Lowry?

Principe Bradford?

Principe SDS Page?

Principe GFP ELISA?