What is LessonUp
Search
Channels
Log in
Register
‹
Return to search
DNA isolatie/knippen en electroforese
DNA practica
Isolatie, knippen en electroforese
1 / 12
next
Slide 1:
Slide
Biologie
MBO
Studiejaar 2
This lesson contains
12 slides
, with
text slides
and
3 videos
.
Lesson duration is:
45 min
Start lesson
Save
Share
Print lesson
Items in this lesson
DNA practica
Isolatie, knippen en electroforese
Slide 1 - Slide
Isolatie
Welke barrières moet je doorbreken om bij het DNA te komen?
Hoe haal je het DNA uit de oplossing?
Celwand afbreken met lysozym
1
Celmembraan afbreken met zeep
2
Met ijskoude ethanol 96% laat je het DNA neerslaan
Slide 2 - Slide
Knippen
Doel: kleinere stukken maken zodat ze te scheiden zijn bij elektroforese
Knippen met behulp van
Restrictie-enzymen (HinDIII)
Restrictie-site
De plaats waar het restrictie-enzym gaat knippen
Slide 3 - Slide
Faag DNA
48.490 basparen lang
Door HinDIII op 7 plekken geknipt 8 DNA fragmenten
Bacteriofaag
Een virus dat een bacterie kan infecteren.
Slide 4 - Slide
Knipmix
Buffer
Zorgt voor een optimale pH voor de restrictie-enzymen
HinDIII
Het restrictie-enzym dat we gebruiken om het DNA te knippen.
MilliQ water
Om de juiste verdunning te krijgen en genoeg volume om te pipetteren.
Monster 1
DNA van de bacterie toevoegen aan de E. coli knipmix
Monster 2
Faag DNA uit de bacteriofaag aan de faag knipmix toevoegen.
Slide 5 - Slide
Electroforese
Doel:
DNA fragmenten scheiden op basis van grootte en lading.
Benodigdheden:
Agarosegel werkt als filter, poriegrootte afhankelijk van de concentratie.
Gelred wordt aan de gel toegevoegd, dit hecht aan het DNA en licht op met UV licht.
Electroforesebak met TAE bufferoplossing: geleidt de stroom en houdt de pH constant
Slide 6 - Slide
Slide 7 - Video
Monster voorbereiding
toevoegen aan de DNA monsters:
Verzwaren van het DNA zodat het in de slotjes zakt.
Geeft het DNA een blauwe kleur zodat het zichtbaar is met het blote oog.
Sample buffer
Ook wel Loading buffer of Loading dye genoemd
Slide 8 - Slide
Slide 9 - Video
Electroforese
DNA is negatief geladen en zal richting de positieve pool migreren.
Kleinere fragmenten kunnen sneller en makkelijker door de poriën in de agarose gel en komen verder.
Fragmenten van gelijke grootte
vormen een "bandje" in de gel.
Slide 10 - Slide
Verwachtingen
Bacterie DNA
Deze strengen zijn te groot om te electroforeren, zelfs na knippen met HinDIII. Ze blijven in het slotje en migreren niet de agar in.
1
Faag DNA
Het faag DNA is in 8 fragmenten geknipt door HinDIII. Je verwacht dus 8 bandjes te zien.
2
Slide 11 - Slide
Slide 12 - Video
More lessons like this
17.2 DNA kopiëren - PCR 6V 2425
June 2022
- Lesson with
19 slides
Biologie
Middelbare school
vwo
Leerjaar 6
P2.3 Nucleïnezuren en tellen van mo
November 2021
- Lesson with
53 slides
Biologie
MBO
Studiejaar 2
BIOP 2020- 2021
March 2021
- Lesson with
36 slides
Biologie
MBO
Studiejaar 2
Hoofdstuk 18 les 2
March 2022
- Lesson with
39 slides
Biologie
Middelbare school
vwo
Leerjaar 6
Voorbereiding 'Proef je PTC'
December 2021
- Lesson with
21 slides
Biologie
Middelbare school
havo, vwo
Leerjaar 5,6
V6 herhaling SE 2
21 days ago
- Lesson with
27 slides
Biologie
Middelbare school
vwo
Leerjaar 6
18.4-2 Regeling van eiwitten in een cel
October 2023
- Lesson with
27 slides
Biologie
Middelbare school
vwo
Leerjaar 6
18.4 Regeling van eiwitten in een cel 6V 2122
March 2022
- Lesson with
39 slides
Biologie
Middelbare school
vwo
Leerjaar 6